Elektroforese: waarvoor dit is, waarvoor dit is en hoe dit gedoen word
Tevrede
- Waarvoor is dit
- Hoe dit gedoen word
- Tipes elektroforese
- 1. Hemoglobien-elektroforese
- 2. Proteïen-elektroforese
Elektroforese is 'n laboratoriumtegniek wat uitgevoer word met die doel om molekules te skei volgens hul grootte en elektriese lading, sodat die diagnose van siektes gemaak kan word, proteïene-uitdrukking geverifieer kan word of mikro-organismes geïdentifiseer kan word.
Elektroforese is 'n eenvoudige en goedkoop prosedure wat gebruik word in laboratoriumroetines en in navorsingsprojekte. Volgens die doel van elektroforese kan dit nodig wees om ander toetse en eksamens uit te voer om byvoorbeeld 'n diagnose te kry.
Waarvoor is dit
Elektroforese kan vir verskillende doeleindes uitgevoer word, sowel in navorsingsprojekte as in diagnose, aangesien dit 'n eenvoudige en goedkoop tegniek is.Dus kan elektroforese uitgevoer word om:
- Identifiseer virusse, swamme, bakterieë en parasiete, met hierdie toepassing meer algemeen in navorsingsprojekte;
- Vaderskapstoets;
- Kontroleer die uitdrukking van proteïene;
- Mutasies kan identifiseer, byvoorbeeld om nuttig te wees by die diagnose van leukemieë;
- Analiseer die soorte sirkulerende hemoglobien, wat nuttig is vir die diagnose van sekelselanemie;
- Bepaal die hoeveelheid proteïene wat in die bloed voorkom.
Volgens die doel van elektroforese kan dit nodig wees om ander aanvullende toetse uit te voer vir die dokter om die diagnose te voltooi.
Hoe dit gedoen word
Om die elektroforese te doen, is die gel nodig, wat van poliakrylamied of agarose kan wees, afhangende van die doel, elektroforese-buffer en vat, molekulêre gewigsmerker en 'n fluoresserende kleurstof, benewens 'n UV- of LED-ligapparaat, ook bekend as 'n transilluminator .
Nadat die gel voorberei is, moet 'n spesifieke voorwerp geplaas word om die putte in die gel te maak, wat die kam in die algemeen genoem word, en die gel te laat stol. As die gel gereed is, dien die stowwe net op die putte toe. Hiervoor moet 'n molekuulgewigmerker in een van die putte geplaas word, 'n positiewe kontrole, wat die stof is wat bekend is wat dit is, 'n negatiewe kontrole wat die geldigheid van die reaksie waarborg en die monsters wat geanaliseer moet word. Alle monsters moet met 'n fluorescerende kleurstof gemeng word, aangesien dit die bande op die transilluminator moontlik is.
Die gel met die monsters moet in die elektroforese vat geplaas word, wat die spesifieke bufferoplossing bevat, en dan word die toestel aangeskakel sodat daar elektriese stroom is en gevolglik potensiaalverskil, wat belangrik is vir die skeiding van die deeltjies volgens tot hul vrag en grootte. Die elektroforetiese tydsduur wissel volgens die doel van die prosedure en kan tot 1 uur duur.
Na die vasgestelde tyd is dit moontlik om die resultaat van die elektroforetiese loop deur die transilluminator te sien. Wanneer die gel onder UV- of LED-lig geplaas word, is dit moontlik om die streeppatroon te sien: hoe groter die molekule, hoe minder migreer dit, hoe nader aan die put, hoe ligter die molekule, hoe groter is die migrerende potensiaal.
Om die reaksie te bekragtig, is dit nodig dat die bande van die positiewe kontrole gevisualiseer word en dat niks in die negatiewe kontrole gevisualiseer word nie, want anders is dit 'n aanduiding dat daar kontaminasie was, en moet die hele proses herhaal word.
Tipes elektroforese
Elektroforese kan vir verskillende doeleindes uitgevoer word en volgens die doel daarvan kan verskillende soorte gel gebruik word, waarvan die meeste poliakrylamied en agarose is.
Elektroforese om mikro-organismes te identifiseer, word meer gereeld in navorsingslaboratoriums uitgevoer, maar vir diagnostiese doeleindes kan elektroforese gebruik word om hematologiese siektes en siektes te identifiseer wat ontwikkel met die toename in die hoeveelheid proteïene, wat die belangrikste soorte elektroforese is:
1. Hemoglobien-elektroforese
Hemoglobien-elektroforese is 'n laboratoriumtegniek wat uitgevoer word om die verskillende soorte hemoglobien wat in die bloed sirkuleer te identifiseer, wat dit moontlik maak om die teenwoordigheid van siektes wat verband hou met die sintese van hemoglobiene te identifiseer. Die tipe hemoglobien word geïdentifiseer deur middel van elektroforese by 'n spesifieke pH, ideaal tussen 8,0 en 9,0, met 'n patroon van bande wat geverifieer kan word met die normale patroon, wat die teenwoordigheid van abnormale hemoglobiene kan identifiseer.
Waarvoor is dit gemaak: Hemoglobien-elektroforese word uitgevoer om siektes wat verband hou met sintese van hemoglobiene, soos sekelselanemie en hemoglobien C-siekte, te ondersoek en te diagnoseer, en is ook nuttig om thalassemie te onderskei. Leer hoe u hemoglobien-elektroforese kan interpreteer.
2. Proteïen-elektroforese
Proteïenelektroforese is 'n ondersoek wat deur die dokter gevra word om die hoeveelheid proteïene wat in die bloed sirkuleer, te bepaal en sodoende siektes te identifiseer. Hierdie toets word gedoen uit 'n bloedmonster wat gesentrifugeer word om die plasma te verkry, watter deel van die bloed, wat onder andere uit proteïene bestaan.
Na elektroforese kan 'n patroon van bande gevisualiseer word en daarna 'n grafiek waarin die hoeveelheid van elke fraksie proteïene aangedui word, wat fundamenteel is vir die diagnose.
Waarvoor is dit gemaak: Proteïenelektroforese stel die dokter in staat om die voorkoms van veelvuldige myeloom, dehidrasie, sirrose, ontsteking, lewersiekte, pankreatitis, lupus en hipertensie te ondersoek volgens die bandpatroon en die grafiek wat in die ondersoekverslag aangebied word.
Verstaan hoe dit gedoen word en hoe u die resultaat van proteïen-elektroforese kan verstaan.